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PDA試管導(dǎo)致瓊脂不能完全凝固的幾種原因
      
  瓊脂:英文名稱為agar,食用菌母種PDA培養(yǎng)基中的A指的就是瓊脂,是用海產(chǎn)的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成的植物膠,因主要來自海南,故稱為“瓊脂”。瓊脂是食用菌母種培養(yǎng)基必須使用的一種物質(zhì),起到固定培養(yǎng)基斜面的作用,菌絲并不能夠利用瓊脂的營養(yǎng)。
  進入6月后,經(jīng)常有朋友問制作的PDA培養(yǎng)基,瓊脂的添加量和以前一樣,為什么現(xiàn)在不能完全凝固了?瓊脂在PDA培養(yǎng)基中添加量是2%,就是1000ml培養(yǎng)基加入瓊脂20克,我們分析一下有幾種原因?qū)е颅傊荒芡耆獭?/span>
  1滅菌過度
  滅菌效果由溫度和時間兩個參數(shù)決定,PDA試管培養(yǎng)基的滅菌溫度是121℃,時間是20-30min,如果兩個參數(shù)有一個超出,就很容易引起瓊脂不凝固。
  解決辦法:PDA試管培養(yǎng)基滅菌時間121℃,30min即可。對于液體培養(yǎng)基的滅菌溫度121℃是足夠的,為了保證滅菌效果將滅菌溫度提高到125℃的做法是錯誤的。
  2瓊脂添加量少
  瓊脂添加量小于2%,或者稱量不準(zhǔn)確導(dǎo)致瓊脂不凝固。
  解決辦法:保證瓊脂添加量2%,校正天平,保證稱量準(zhǔn)確。
  3瓊脂質(zhì)量差
  使用劣質(zhì),或者長期存放的瓊脂可能會導(dǎo)致瓊脂不凝固。
  解決辦法:使用優(yōu)質(zhì)瓊脂,有條件的一定要使用瓊脂粉,瓊脂條是食品添加劑,瓊脂粉是實驗試劑,質(zhì)量可靠。
  4加水量不準(zhǔn)
  配置培養(yǎng)基時,加水過多會導(dǎo)致瓊脂不凝固。
  解決辦法:加水準(zhǔn)確,以及熬制后重新稱量,稱量要用量筒,或者校正過的燒杯。
  5分裝時瓊脂沉淀
  在分裝時,如果瓊脂沒有完全溶解,就很容易出現(xiàn)沉淀的情況,這樣先分裝的瓊脂濃度就低,出現(xiàn)不能完全凝固的情況。
  解決辦法:做到完全溶解,同時邊攪拌,邊分裝,均勻一致。
  6pH值過低
  pH值低于4.5,培養(yǎng)基酸化,瓊脂會不凝固。
  解決辦法:引起PDA培養(yǎng)基酸化的原因主要是水的ph,所以盡量使用桶裝水,桶裝水呈弱堿性,而且穩(wěn)定。
  7環(huán)境溫度高
  夏天,一些沒有空調(diào)的工廠,制作好的PDA培養(yǎng)基因環(huán)境溫度過高而導(dǎo)致不能完全凝固。
  解決辦法:在夏季可以將1000ml培養(yǎng)基的添加比例提高到22克,如果需要添加到30克才能夠凝固,說明瓊脂質(zhì)量有問題了。有條件的可以安裝空調(diào)。
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