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阪崎腸桿菌MMS基因檢測質粒DNA標準物質
??【編號】:GBW(E)100305

??【產(chǎn)品名稱】:阪崎腸桿菌MMS基因檢測質粒DNA標準物質

??【規(guī)格】:1.5mL;52.3 ng/μL(1.71×1010copies/μL)

??【用途】:

  阪崎腸桿菌MMS基因檢測質粒DNA標準物質

  編號: GBW(E)100305
  規(guī)格: 1.5mL離心管
  標準值:52.3 ng/μL(1.71×1010copies/μL)
  不確定度:Urel=3.4%(k=2)
  一、樣品制備
  在GenBank中搜索阪崎腸桿菌的大分子合成操縱子(MMS)基因序列;對上述序列進行分析,選擇合適的序列和合適的酶切位點,并將酶切位點加至序列兩端;將處理后的序列進行全基因人工合成,并將所得全長基因分別克隆至質粒載體pUC19中,構建獲得包含目的基因序列的質粒DNA標準物質。利用大腸桿菌DH5α載體,復制生產(chǎn),對目標質粒DNA進行提取純化,經(jīng)稀釋分裝得到質粒DNA樣品。
  二、溯源性及定值方法
  本標準物質中質粒DNA采用紫外分光光度法和高分辨電感耦合等離子體質譜法(HR-ICP-MS)進行定值。
  核酸分子含有嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的共軛雙鍵,其紫外可見吸收光譜在260 nm附近有一強的吸收峰,針對雙鏈DNA,樣品濃度和吸光值之間有以下關系:雙鏈DNA樣品濃度= OD260×核酸稀釋倍數(shù)×50,其中OD260為核酸在260 nm處的吸光值。用超純水做空白對照,通過測定其在260 nm處的吸光值可換算出質粒濃度。
  核酸分子中,每個堿基對應一個磷原子,根據(jù)公式:含磷量P%=堿基數(shù)*磷的原子量÷DNA分子量,即可計算出四個質粒DNA標準物質的含磷量。再利用HR-ICP-MS方法檢測標準物質樣品中的磷元素含量,計算得到質粒DNA標準物質的含量。
  定值過程使用滿足計量學特性要求的測量方法和計量器具,保證其溯源性。
  三、特性量值及不確定度
標準物質名稱 標準值 相對擴展不確定度
k=2
阪崎腸桿菌MMS基因檢測質粒DNA標準物質 [濃度] 3.40%
  保質期: 12個月
  來源:計量院
  類別:國標物、阪崎腸桿菌MMS基因
  聲明:此對照品、標準品由【中檢計量】提供網(wǎng)站查詢購買服務
  注:點擊cas,或者搜索:名稱、編號、cas均可顯示價格
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